【導(dǎo)語(yǔ)】

固相萃取（SPE）看似簡(jiǎn)單——活化、上樣、淋洗、洗脫，四步搞定。

但實(shí)際做下來(lái)，回收率低、重現(xiàn)性差、峰形異常……問題往往不在柱子，而在操作細(xì)節(jié)。

以下這5個(gè)常見“坑"，看看你有沒有踩過(guò) ??

? 錯(cuò)誤一：活化/平衡溶劑用量或順序不對(duì)

常見問題：

·       只用甲醇活化，忘了用上樣緩沖液平衡；

·       活化后柱床干涸（空氣進(jìn)入填料）；

·       有機(jī)相比例與上樣液差異過(guò)大，未重新平衡。

正確做法：

·       先用強(qiáng)洗脫溶劑（如甲醇）潤(rùn)濕填料；

·       再用與上樣液相同 pH / 離子強(qiáng)度 / 有機(jī)相比例 的緩沖液平衡；

·       保持液面始終高于填料，防止柱床干裂。

?? 柱床一干，回收率基本就廢了。

? 錯(cuò)誤二：上樣體積過(guò)大或流速太快

常見問題：

·       為省時(shí)間加大流速（> 1–2 mL/min）；

·       上樣體積遠(yuǎn)超柱容量（尤其是 HLB/C18 小柱）。

正確做法：

·       參考廠家給出的吸附容量（mg/g），推算最大上樣量；

·       上樣流速一般控制在 1 mL/min 左右；

·       必要時(shí)分次上樣或選用大容量柱。

?? 過(guò)柱≠倒水，吸附是需要時(shí)間的。

? 錯(cuò)誤三：樣品 pH / 離子強(qiáng)度未優(yōu)化

常見問題：

·       忽略目標(biāo)物 pKa，導(dǎo)致電離態(tài)不利于吸附；

·       水樣直接上機(jī)，未調(diào)節(jié) pH 或未加鹽（離子強(qiáng)度影響保留）。

正確做法：

·       酸性化合物 → 酸性條件下（分子態(tài)）更易保留于 C18/HLB；

·       堿性化合物 → 堿性條件；

·       必要時(shí)加 NaCl 抑制極性干擾物。

?? SPE 不是萬(wàn)能捕手，pH 決定留不留得住。

? 錯(cuò)誤四：淋洗步驟“過(guò)度清洗"或“洗太輕"

常見問題：

·       淋洗液中有機(jī)相偏高 → 把目標(biāo)物一并洗掉；

·       淋洗不足 → 基質(zhì)干擾殘留，色譜出現(xiàn)雜峰。

正確做法：

·       淋洗液目的是去除基質(zhì)干擾但不洗脫目標(biāo)物；

·       做方法驗(yàn)證時(shí)，建議做淋洗強(qiáng)度梯度實(shí)驗(yàn)確認(rèn)安全窗口。

?? 淋洗是 SPE 里最容易被忽視、也最影響選擇性的步驟。

? 錯(cuò)誤五：洗脫溶劑種類/體積不匹配

常見問題：

·       洗脫能力偏弱（如只用 30% 甲醇洗強(qiáng)保留物）；

·       洗脫體積過(guò)小，未完整將目標(biāo)物洗下。

正確做法：

·       通常先用 高有機(jī)（甲醇/乙腈）→ 必要時(shí)加酸/堿/氨水改性；

·       分次洗脫（如 2×1 mL 優(yōu)于 1×2 mL）；

·       收集洗脫液后可氮吹復(fù)溶至確定體積。

?? 洗不下來(lái) ≠ 沒吸附，可能是洗脫條件不夠“狠"。

? 小結(jié)

SPE 成功 = 合適的柱型 + 正確的活化平衡 + 優(yōu)化的 pH/離子強(qiáng)度 + 合理流速 + 驗(yàn)證過(guò)的淋洗/洗脫條件。

新手常犯的錯(cuò)，大多集中在前三步。

把細(xì)節(jié)做對(duì)，回收率和 RSD 自然會(huì)乖乖聽話。

萊奧Purifier A系列正壓固相萃取儀

核心特點(diǎn)：

·       高品質(zhì)；

·       高回收率；

·       良好的平行性；

·       美學(xué)設(shè)計(jì)。

產(chǎn)品功能&優(yōu)勢(shì)：

萊奧正壓固相萃取儀可輕松高效地萃取目標(biāo)化合物，完成活化、上樣、淋洗和洗脫的SPE全部流程，相比負(fù)壓裝置可提供更高壓力（最高100psi），且流速可控，有很好的重復(fù)性和回收率，深受實(shí)驗(yàn)人員喜愛。